烤烟去甲基萘醌甲基转移酶类似基因cDNA克隆与生物信息学分析

去甲基萘醌甲基转移酶是甲基萘醌代谢途径中的最后一步关键酶,能将二甲基萘醌转化为甲基萘醌,还可以调节RNA的代谢,从烤烟品种南江3号(Nicotiana tobacum cv.Nanjiang-3)均一化cDNA文库中克隆获得l个去甲基萘醌甲基转移酶类似基因cDNA全长序列,命名为T-DM1,GenBank 中的登录号为H0663886,该基因全长741 by.利用ORF finder和ProtParam软件分析表明,它包含一个长度为501 by的完整开放读码框,编码一个含有166个氨基酸、等电点为5.70、分子量为17.77 kV的蛋白.Blast搜索结果及进化分析结果表明,烤烟T-DMI基因编码的蛋白与棉花、玉米和拟南芥的去甲基萘醌甲基转移酶基因具有较高的同源性,其一致性分别为96%,86%和85%.     

白菜型油菜BraSDG8基因的克隆与序列分析

通过序列的同源性分析,在白菜型油菜中克隆得到拟南芥中的1个花期调控基因SDG8的全长cDNA,命名为BraSDG8.BraSDG8全长4 963 bp,编码1 654个氨基酸,其中第867位至第1 060位氨基酸连续构成AWS domain、SET domain、Post SET domain 3个结构域,与拟南芥中的...     

流动注射化学发光法测定茶叶对羟自由基的清除率

建立了Fe²⁺-H₂O₂-亚甲基蓝化学发光新体系,并用于茶叶对羟自由基（·OH）清除率的测定。实验发现,在酸性介质中,Fe²⁺和H₂O₂在线生成的·OH与亚甲基蓝反应能产生极强的化学发光,茶叶提取液可清除溶液中部分·OH,使化学发光强度降低。据此,结合流动注射技术,建立了测定茶叶对·OH清除率的化学发光新方法。对不同茶类的成茶及苦丁茶和绞股蓝茶清除·OH作用进行了比较研究,结果表明,绿茶对·OH的清除率最高,抗氧化活性最强。     

丝氨酸蛋白酶与植物器官衰老关联的研究进展

丝氨酸蛋白酶是最大的一类蛋白酶家族,广泛参与植物的衰老、细胞分化、超敏反应、蛋白质降解和加工等生理过程。笔者综述了丝氨酸蛋白酶家族在植物体内作用,丝氨酸蛋白酶在植物器官衰老方面的作用以及在瓶插切花衰老方面的研究进展。     

17α-甲基睾酮对稀有鮈鲫精巢DNA甲基转移酶基因表达的影响

[目的] 以稀有鮈鲫雄鱼为研究对象,探讨17α-甲基睾酮（17α-methyltestosterone,MT）对稀有鮈鲫精巢甲基转移酶（DNMT）基因相对表达量的影响。[方法] 采用不同浓度MT（25、50和100 ng/L）处理稀有鮈鲫雄鱼7、14和21 d,处理结束时,每组随机解剖10条鱼,取精巢组织,Trizol一步法提取总RNA,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测DNA甲基转移酶基因（dnmts）相对表达量。[结果] MT处理稀有鮈鲫雄鱼7 d,25 ng/L MT处理组（P<0.05）、50 ng/L MT处理组（P<0.01）和100 ng/L MT处理组（P<0.05）精巢dnmt3基因相对表达量显著（或极显著）降低;25 ng/L MT处理组和50 ng/L MT处理组精巢dnmt5基因相对表达量显著（P<0.05）降低;50 ng/L MT处理组精巢dnmt7基因相对表达量显著（P<0.05）降低。MT处理稀有鮈鲫雄鱼14 d,100 ng/L的MT处理组dnmt3、dnmt5、dnmt6、dnmt7基因相对表达量显著（P<0.05）升高;50 ng/L的MT处理组dnmt1基因相对表达量极显著（P<0.01）升高。MT处理稀有鮈鲫雄鱼21 d,50 ng/L MT处理组和100 ng/L MT处理组dnmt1基因相对表达量显著（P<0.05）升高;100 ng/L MT处理组dnmt8基因相对表达量极显著（P<0.01）升高。[结论] MT可以干扰稀有鮈鲫精巢DNA甲基转移酶基因dmmts的mRNA表达。MT对DNMTs酶活性的影响以及是否可以通过改变DNA甲基化水平对稀有鮈鲫精子的发生产生影响有待研究。     

Serine-to-glycine ratios in low-protein diets regulate intramuscular fat by affecting lipid metabolism and myofiber type transition in the skeletal muscle of growing-finishing pigs

Serine and glycine are 2 of the first-affected nonessential amino acids in low crude protein (CP) diets for pigs. Therefore, we explored the effects of different dietary serine-to-glycine ratios on growth performance and lipid metabolism in growing-finishing pigs. A total of 160 crossbred healthy barrows, with a similar body weight of around 59.50 kg, were randomly allotted into 1 of 5 treatments (8 pens per treatment and 4 pigs per pen). The serine-to-glycine ratios of the 5 dietary treatments were as follows: diet A (NORMAL group), 1.18:1 (16% CP); diet B (LOW group), 1.2:1 (12% CP); diet C (S2G1 group), 2:1 (12% CP); diet D (S1G2 group), 1:2 (12% CP); and diet E (S1G1 group), 1:1 (12% CP).We found that the pigs fed a low CP diet (12% CP), when maintaining serine-to-glycine ratio at 1:2 and a total amount of 1.44%, had the same average daily gain as the pigs fed a normal CP diet (16% CP) (P > 0.05), but they had increased intramuscular fat (P < 0.05). Furthermore, they exhibited higher expression of genes involved in lipid oxidation (P < 0.05), which was regulated by modulating methylation levels in the promoters of acyl-CoA oxidase 1 (ACOX1) and acyl-CoA dehydrogenase medium chain (ACADM). When compared with the pigs fed a normal CP diet, these pigs had more oxidative myofibers (P < 0.05), which were regulated by AMPK-PGC-1α and Calcineurin-MEF2/NFAT pathways in a coordinated manner. Our findings suggested that a dietary serine-to-glycine ratio of 1:2 is beneficial for improving meat quality in pigs fed a low CP diet.     

猪DNA甲基转移酶基因家族进化分析

【目的】 探究猪DNA甲基转移酶（DNMT）基因家族的基因特性及表达模式。【方法】 利用生物信息学方法鉴定猪全基因组范围的DNMT基因家族，并对其染色体定位、理化性质、蛋白质结构、亚细胞定位、基因结构、保守基序、系统进化关系、共线性关系和基因表达模式进行分析。【结果】 共鉴定得到5个猪DNMT基因家族成员：PigDNMT1、PigDNMT2、PigDNMT3、PigDNMT4和PigDNMT5，分别位于2、3、13、14、17号染色体上。猪DNMT基因家族进化树分析发现，PigDNMT1和PigDNMT4、PigDNMT2和PigDNMT5的亲缘关系较近。PigDNMT2和PigDNMT5具有相同数量和排列顺序的保守基序，但在基因结构上差异较大。系统进化树结果揭示，猪、人、小鼠和牛的DNMT基因家族分为4个亚族，其中猪与牛的DNMT基因家族亲缘关系更近。基因共线性分析显示，猪与人、小鼠、牛之间都具有4对直系同源DNMT基因，表明4个物种的DNMT基因间存在较强的共线性关系。猪DNMT家族蛋白长度在228~1 706个氨基酸之间，分子质量在26 133.32~192 267.80 u之间，等电点在6.00~9.06之间。二级结构预测分析结果显示，猪DNMT蛋白主要由无规则卷曲组成。亚细胞定位分析发现，5个猪DNMT蛋白定位于细胞核。母猪性腺轴的转录组数据分析发现，PigDNMT1在下丘脑、垂体和卵巢组织中随着初情启动过程而展现出不同的表达模式。【结论】 本研究在猪基因组上共鉴定出5个DNMT基因，并发现性腺轴组织中的PigDNMT1在初情启动过程中呈现出不同的表达模式，为解析猪DNMT基因家族功能提供一些参考。     

通过泰乐内酯羟基的选择性氧化改进泰地罗新合成工艺

泰地罗新是一种新型泰乐菌素类抗生素，其特征是将泰乐菌素内酯C20,23的取代基用哌啶取代。本研究为解决C23羟基氨化反应难度较高的问题，通过TEMBO选择性氧化,将泰乐内酯23位羟基氧化为羰基。再与哌啶进行Wallach反应，以合成泰地罗新。该路线规避了C23羟基碘化过程成本高、反应得率低的问题，反应平均总摩尔收率90.11%，终产物含量971 mg/g。